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CN色谱柱说明书

一、色谱柱简介

CN液相色谱柱，其填料采用本公司独有的创新性填料键合工艺，以超高纯全多孔球形硅胶为基质，键合氰丙基官能团，通过严格的工艺过程控制，保证形成均一、致密氨基官能团分子层，最大限度的提高了键合覆盖率，确保柱填料具有优异的稳定性。

反相氰基柱对疏水性分子洗脱快，对极性化合物具有独特的选择性，对强碱性化合物（包括铵盐在内）分离也有良好的峰型。与C18、C8等反相柱具有不同的选择性。在疏水性十分强的化合物用标准的C18和C8柱或典型的反相洗脱液不能洗脱时，可用氰基柱。

在正相色谱柱可以替代硅胶柱，有快速平衡和比非衍生硅胶活性更一致的特点。可替代市面上的大部分氰基液相色谱柱。

二、色谱柱特点

在正相和反相中都可以得到应用；

稳定的高覆盖率键合相；

较低的疏水性，具有独特的选择性

三、色谱柱参数

键合相	氰丙基
粒径	3µm，5µm，10µm，
孔径	120Å
比表面积	320m2/g
封尾	封尾
pH值稳定性	1.5～9.0

四、新柱活化

    1、正相使用（流动相为：己烷，异丙醇，乙酸乙酯等非极性或弱极性试剂）：

用异丙醇低流速冲洗色谱柱20倍柱体积，然后用测试流动相平衡色谱柱即可；

2、反相使用（流动相为：水，甲醇，乙腈等极性试剂）：

用异丙醇低流速冲洗色谱柱50倍柱体积，然后用甲醇或乙腈（选择与测试使用流动相所使用的有机相相同），测试流速冲洗色谱柱10-20倍柱体积即可。

以250mm长度色谱柱为例，色谱柱的柱体积和建议用异丙醇活化时的流速：

内径（mm）	柱体积（ml）	新柱建议平衡流速
2.1	约0.9	0.1ml/min
4.0	约2.2	0.2ml/min
4.6	约3.0	0.2ml/min

备注：再使用异丙醇活化完柱子，切换成下一个体系的流动相时，刚开始也需要使用低流速过渡，待压力降低并稳定时，再换成测试时的流速。

 

五、日常维护

1 正相使用：

1.1 建议检测前样品和流动相进行过滤；

1.2 建议每天做完样品后及时进行清洗；

1.3 日常使用完后，用流动相冲洗10～20倍柱体积或实验中最后一个峰的保留时间2倍。

1.4 色谱柱保存

1）短时间内色谱柱的保存:

如果使用时间间隔不超过四天，保存在不含有酸碱的流动相同组成的有机溶剂中。

  2）长时间色谱柱的保存:

依次使用异丙醇和本产品质检报告所示的流动相（正己烷/异丙醇=99.5/0.5）冲洗20倍柱体积后，将其从HPLC仪中取下，用塑料塞头将其密封，放置于阴凉干燥处，以免色谱柱内溶剂挥发。

2 反相使用：

2.1 建议检测前样品和流动相进行过滤；

2.2 建议每天做完样品后及时进行清洗；

2.3 常规流动相（不含缓冲液）条件：使用前可以直接切换成流动相检测，检测完成后，使用甲醇或乙腈冲洗10～20倍柱体积即可；

2.4 使用缓冲液条件：使用缓冲液之前使用过渡流动相冲洗色谱柱10倍柱体积，然后切换成流动相检测样品，检测完成后，同样需要使用过渡流动相冲洗色谱柱20倍柱体积，再用甲醇或乙腈冲洗10～20倍柱体积即可；

注意：① 过渡流动相是指有机相和水相比例与分析流动相相同比例，只是不含有缓冲盐；

      ② 缓冲盐溶液不能存留色谱柱中；

2.5色谱柱的保存

1. 短时间内色谱柱的保存

如果使用时间间隔不超过四天，保存甲醇或乙腈中即可。

  2）长时间色谱柱的保存

依次使用异丙醇和本产品质检报告所示的流动相（正己烷/异丙醇=99.5/0.5）冲洗20倍柱体积后，将其从HPLC仪中取下，用塑料塞头将其密封，放置于阴凉干燥处，以免色谱柱内溶剂挥发。

六、注意事项

1）CN色谱柱使用pH范围在1.5～9.0，通常建议使用范围pH为2.0～8.0比较合适，流动相超出pH范围将会导致硅胶流失使柱效下降，进而影响使用寿命，所以要严格控制pH范围；

3）使用温度：柱温最高不超过60℃，建议40℃以下使用。