HPLC 中最重要的事情是在最短时间内获得"最佳分辨率"。
两个峰值之间的分辨率值为 1.5 或更高,将确保样品组件与"基线"相分离 -以准确测量每个峰值的区域或高度的程度。
分辨率是其他三个参数的函数,即保留因子 (k)、选择性 (α) (峰值顶点的分离) 和峰值的效率 (N) (宽度)。
每个山峰底部的宽度是峰值基座被绘制到峰值两侧拐点的切线截获的段。如图所示。
峰值宽度和保留时间以时间单位进行测量,因为该分辨率是一个无维度参数。
方法一:
方法二:
那么,您如何能够控制从色谱分离中获得的分辨率呢?基本分辨率方程(如图所示)表示分辨率受三个重要参数的影响:
选择性(分离因子)
效率
保留(容量因子)
那么,这些因素如何有助于分离的解决,是否有目标值可以瞄准或限制参数的改变对分辨率没有实际影响?这些问题的答案是肯定的,了解每个参数影响分辨率的方式非常重要。以下页面将描述每个参数、如何更改它们,以及它们对色谱分辨率的影响。